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PCR基因擴增設計與裝修要點分析

  PCR是基因擴增實驗室的簡稱，目前，PCR實驗室沒有關(guān)于設計與建設的國家標準規(guī)范，比較詳細的官方文件是推薦性標準《檢驗檢測實驗室設計與建設技術(shù)要求》、衛(wèi)生部辦公廳的紅頭文件《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》通知，其中的重點都是關(guān)于如何管理PCR基因擴增實驗室，對于具體如何設計與建設基因擴增實驗室的描述比較少，比如：雙走廊的結(jié)構(gòu)的PCR公共走廊、獨立緩沖間室內(nèi)壓力確定，四個功能區(qū)具體壓力應為多少，也沒有典型布局圖供參考，許多從業(yè)者感覺具體操作的時候感覺比較迷茫。這里我們和大家分享基因擴增實驗室的建設經(jīng)驗供參考：
  一、PCR的公共走廊應為微正壓，人流應單向朝著產(chǎn)物分析區(qū)。設計與建設時可采用一側(cè)門只能進、另一側(cè)門只能出的方式實現(xiàn)。
  二、關(guān)于獨立緩沖間壓力。有些從業(yè)者認為獨立緩沖間應為正壓，認為正壓起到截斷作用，才能確保氣流不會交叉污染。我們認為這個觀點是錯誤的，因為正壓房間的氣流向兩側(cè)房間分流，緩沖間存在污染的可能，正壓并不可靠。負壓的緩沖間可讓兩側(cè)房間匯流排出室外，即使緩沖間或公共走廊有污染，也因為合流排出室外、避免分流到對面房間而造成交叉污染。
  三、關(guān)于是否需要空氣潔凈工藝處理的爭論。 這個爭議很久了，我們認為日常的衛(wèi)生清潔、紫外滅菌已經(jīng)足夠�，F(xiàn)代成熟的PCR擴增技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且是封閉式操作的，氣溶膠污染大大降低，與常規(guī)PCR相比，它已經(jīng)有效解決PCR污染問題、自動化程度高，目的片段的濃度要遠遠大于環(huán)境里隨機片段的濃度. 所以環(huán)境并不需要特別的潔凈過濾處理，關(guān)鍵措施是避免與其它功能間交叉污染。
  四、關(guān)于開窗問題。這個爭論其實有點糾結(jié)，全自動的熒光定量PCR是封閉運行的，氣溶膠污染大大降低，密閉房間的污染風險很小，但是也并非萬無一失，所以實驗室整體裝修的外窗還是建議不要做固定密閉窗，這樣一旦污染，*簡單的做法就是開啟外窗通風，稀釋污染物，同時紫外燈長時間照射、換掉全部耗材、并用次氯酸鈉等全面消毒擦洗。